Mohato o tsamaeang o lekana le mokelikeli oa mali, 'me ho na le lintho tse sa tšoaneng tseo u lokelang ho li ela hloko nakong ea tšebeliso. Har'a tsona, ho na le "maraba" a mang a lokelang ho eloa hloko.
01. Lekanya pH ea mohato oa selefouno ka mor'a ho eketsa motsoako oa motsoako
Haeba u lekanya pH ka motsoako oa lintho tse phelang, pH eo u e fumanang e tla fapana le pele u eketsa motsoako oa motsoako. Leha ho le joalo, ntho ea bohlokoa ka ho fetisisa ke ho tsitsa. Haeba kamehla u lekanya pH ka mor'a ho eketsa motsoako oa motsoako, etsa bonnete ba hore u bolela mehato ea hau ka mokhoa oo u o sebelisang e le hore ba bang ba latele mokhoa o tšoanang. Mokhoa ona ha oa nepahala ka 100%, empa bonyane o tla boloka mokhoa o tsitsitseng. Sena se ka ba bohlokoa ho feta ho fumana boleng bo nepahetseng ba pH.
02. Ha ho buffer e sebelisitsoeng
Sepheo sa buffer ke ho laola pH le ho e thibela ho fetoha. Mekhoa e meng e mengata e fetola pH ea karolo ea selefouno, e ka bakang liphetoho nakong ea ho boloka, sebopeho sa tlhoro, le karabelo ea tlhoro.
Formic acid, TFA, joalo-joalo ha se li-buffers
03. Ho se sebelise buffer ka har'a mofuta o tloaelehileng oa pH
Buffer e 'ngoe le e 'ngoe e na le bophara ba yuniti ea 2 pH, moo e fanang ka botsitso bo botle ka ho fetisisa ba pH. Li-buffer tse ka ntle ho fensetere ena li ke ke tsa fana ka khanyetso e sebetsang ho liphetoho tsa pH. Sebelisa sekheo se maemong a nepahetseng, kapa khetha sekoaelo se koahelang pH eo u e hlokang.
04. Eketsa buffer ho tharollo ea manyolo
Ho kopanya tharollo ea "buffer" le "organic phase" ho tla etsa hore "buffer" e na le pula. Maemong a mangata, le haeba pula e na, ho ntse ho le thata ho e lemoha. Hopola ho lula u eketsa tharollo ea organic mokhahlelong oa metsi, e ka fokotsang haholo monyetla oa ho ba le pula e ngata.
05. Kopanya gradient ea mahloriso ho tloha ho 0% ka pompo
Lipompo tse fumanehang kajeno li ka kopanya ka katleho mekhahlelo ea mobile le degas inline, empa ha se motho e mong le e mong ea sebelisang mokhoa oa hau ea tla ba le pompo ea boleng bo holimo. Kopanya A le B ho tharollo e le 'ngoe' me u e tsamaise 100% inline.
Ka mohlala, 950 ml ea motsoako o qalang o ka lokisoa ka ho kopanya le 50 ml ea metsi. Molemo oa sena ke hore e ka fokotsa phapang pakeng tsa HPLC le ho fokotsa monyetla oa ho ba le li-bubble le pula ka har'a tsamaiso. Ke habohlokoa ho hlokomela hore karo-karolelano ea motsoako oa pompo ke 95: 5, e sa bolele hore nako ea ho boloka e tsoakiloeng ka botlolo e boetse e le 95: 5.
06. Ho se sebelise acid e nepahetseng e fetotsoeng (base) ho fetola buffer
Sebelisa feela asiti kapa setsi se etsang letsoai la buffer leo u le sebelisang. Mohlala, buffer ea sodium phosphate e lokela ho lokisoa ka asiti ea phosphoric kapa sodium hydroxide feela.
07. Ho se bolele lintlha tsohle mabapi le buffer ka mokhoa, joalo ka ho eketsa 5g easodium phosphate ho 1000ml ea metsi.
Mofuta oa buffer o etsa qeto ea hore na pH ea mofuta ofe e ka thijoa. Ho tsepamisa mohopolo ho hlokahalang ho lekanya matla a buffer. Ligrama tse 5 kapa anhydrous sodium phosphate le ligrama tse 5 tsa monosodium phosphate monohydrate li na le matla a fapaneng a buffer.
08. Ho eketsa metsoako ea manyolo pele u hlahloba
Haeba mokhoa o fetileng o sebelisitse tharollo ea "buffer" bakeng sa motheo oa B, 'me mokhoa oa hau o sebelisa tharollo ea tlhaho bakeng sa motheo oa B, ka tšepo u ka khona ho lokisa "buffer" ka har'a li-tubing tsa pompo le hlooho ea pompo.
09. Phahamisa botlolo 'me u tšolle lerotholi la ho qetela
Ho na le monyetla o motle oa hore u se ke ua ba le karolo e lekaneng ea selefouno ho phethela ts'ebetso eohle mme sampole ea hau e tla tsuba. Ntle le monyetla oa ho chesa sistimi ea pompo le kholomo, karolo ea selefouno e tla fetoha mouoane ka ho felletseng mme karolo ea mohala e kaholimo ho botlolo e tla fetoha.
10. Sebelisa ultrasonic degassing mobile phase
Ntlha ea bohlokoa ka ho fetisisa ke ho etsa bonnete ba hore matsoai ohle a buffer a qhibiliha, empa ena ke tsela e mpe ka ho fetisisa ea ho senya 'me e tla futhumatsa ka potlako karolo ea selefouno, e leng se etsang hore likaroloana tsa tlhaho li fetohe mouoane. Ho boloka mathata a sa hlokahaleng hamorao, nka metsotso e mehlano ho hlakola karolo ea hau ea mohala.
Nako ea poso: Aug-27-2024